Hydroxylering is iedere
biochemische reactie waarbij een
hydroxylgroep (OH) wordt toegevoegd aan een
molecuul, meestal onder vervanging van een ander
atoom zoals
waterstof waarbij het
zuurstofatoom van de hydroxy-groep de plaats van het vervangen atoom inneemt. Het is een vorm van
oxidatie. Hydroxylering is een van de belangrijkste en meest voorkomende reacties in de biochemie van de levende wezens waaronder ook de mens. De biochemische hydroxylering wordt meestal door specifieke
enzymen, zogenaamde hydroxylases, uitgevoerd waarbij meestal ascorbinezuur (
vitamine C) als noodzakelijke
co-factor optreedt. Over het algemeen (biochemisch) wordt de hydroxy-groep aan een
koolstofatoom gebonden en vervangt deze een waterstofatoom.