Das Nikolaiviertel liegt im Berliner Ortsteil Mitte, am östlichen Ufer der Spree zwischen dem Fluss (Spreeufer-Straße), dem südwestlichen Abschnitt der Rathausstraße, der Spandauer Straße und dem Mühlendamm. Es ist das älteste Wohngebiet Berlins mit der Nikolaikirche in seinem Zentrum.